Herpesová infekce může být hnízdištěm neplodnosti, protože viry mají nepříznivý vliv na reprodukční zdraví žen i mužů. Ale i na počátku těhotenství způsobují herpetické viry vážné riziko intrauterinní infekce plodu a nežádoucí výsledek těhotenství [1, 4, 5, 7]. Virus herpes simplex (HSV) je často příčinou neurologických, somatických a endokrinních problémů u novorozenců a starších dětí [3]. Genitální lokalizace herpesu je zvláště nebezpečná, což se vyskytuje u těhotných žen v 7-35% případů [2, 6].
Cílem této práce bylo studium optimalizace diagnostiky herpetické infekce u těhotných žen se zatěžovanou porodní a gynekologickou historií (AHA) v dynamice těhotenství.
Bylo vyšetřeno 74 těhotných žen: 49 primiparous a 25 multiparous. Věk pacientů je od 20 do 41 let. Všechny ženy měly OAGA a byly odeslány do společnosti MONIIAH s diagnózou "chronické virové infekce herpesu". Studie probíhala v dynamice od 16 do 24 týdnů. těhotenství.
Pro identifikaci markerů HSV byla použita virologická metoda (BCM), molekulární biologie (PCR, real-time PCR) a serologické metody (ELISA). Zkoušky krve, moči a urogenitálu byly studovány jako klinický materiál těhotných žen. O virové zátěži v různých klinických materiálech bylo posuzováno množství HSV DNA, které bylo stanoveno metodou PCR-rt. Pro každý vzorek byla zaznamenána hodnota Ct prahového cyklu (prahový cyklus je bod, v němž fluorescence překračuje hodnotu pozadí) a byly vypočítány mediány. Získané hodnoty prahového cyklu (Ct) byly porovnány s hodnotami standardních kontrolních vzorků se známým obsahem DNA ve vzorku. Za účelem stanovení parametrů humorální odezvy se sérová TIFA testovala na přítomnost specifických protilátek proti HSV (AT) tříd IgM a IgG. Rovněž byla stanovena aktivita protilátky, která byla vyjádřena v titrech, a avidita IgG-AT, která byla posuzována indexem avidity (AI).
Mezi těhotnými ženami bylo zjištěno vysoké riziko infekce: 43 (58%) ze 74 žen mělo jednu nebo jinou urogenitální infekci (IGO) virové a / nebo bakteriální etiologie. Metoda diagnostiky IGO - PCR s kvalitativním hodnocením výsledku. Podrobné vyšetření anamnézy ukázalo, že u 21 (28%) těhotných žen byla zjištěna smíšená IGO. Struktura infekce zahrnovala celou řadu patogenů UGO: Ureaplasma urealiticum, Micoplasma hominis, Toxoplasma gondii, Gardnerella vaginalis, Chlamidia trahomatis, Candida albicans, Human papillomavirus. U 22 (30%) těhotných žen se zjistilo, že jediným původcem IGO je Ureaplasma urealiticum - u 15 (20,4%), Micoplasma hominis - u 4 (5,4%). V tomto případě se pacient stěžoval, nebyly žádné klinické příznaky infekce. Gardnerella vaginalis byla nalezena u 3 (4,2%) těhotných žen..
V první fázi vyšetření pacientů byla provedena komparativní analýza frekvence detekce přímých markerů HSV (infekční aktivita viru a HSV DNA). Žádná z těchto žen neměla během vyšetření žádné klinické projevy genitálního herpesu. Pacient byl považován za infikovaný, pokud byl virový marker detekován v alespoň jednom ze studovaných klinických materiálů. Během celého vyšetřovacího období mělo 18 (24,3%) těhotných žen HSV markery. Současně byla HSV DNA detekována u 15 (20,3%) těhotných žen, infekčního viru - u 3 (4%) žen (obr. 1). Rozdíly v frekvenci detekce HSV DNA ve srovnání s infekčním aktivním virem byly statisticky významné (str<0,05).
Byla stanovena frekvence detekce HSV v různých klinických materiálech. 525 biologických materiálů těhotných žen bylo vyšetřeno na přítomnost přímých markerů HSV: 175 vzorků krve, vzorků moči a urogenitálních výplní. Při analýze všech studovaných vzorků byly nejčastěji detekovány všechny použité metody (BKM, PCR a PCR-rt) markery HSV urogenitálních výpalků (27/175, 15,4%) a vzorků moči (20/175, 11,4%) , výrazně méně - v krvi (4/175, 2,3%, str<0,05).
Spolu s celkovým hodnocením byla provedena komparativní analýza frekvence detekce markerů HSV v závislosti na metodě. HSV DNA byla detekována pomocí PCR v 16/525 (3%) vzorcích a PCR-rt ve vzorcích 30/525 (5,7%). Statistická analýza ukázala, že metoda PCR-rt detekovala virovou DNA významně častěji než klasická metoda PCR (str<0,05). Инфекционно-активный вирус в биологических материалах (БКМ) обнаруживался значительно реже, чем ДНК ВПГ - в 5/525 (1%) пробах. Таким образом, чувствительность обнаружения ВПГ методом ПЦР-rt превышала чувствительность двух других использованных методов.
Nízká incidence HSV v klinických vzorcích může být vysvětlena buď nepřítomností infekčního aktivního viru v těchto vzorcích za přítomnosti virové DNA, nebo nižší citlivostí metody CTB ve srovnání s PCR.
Studie ukázaly, že množství DNA obsažené v moči a urogenitálních výpalcích je vyšší než množství DNA v krevních vzorcích. Když statistické zpracování hodnot mezních hodnot prahových cyklů (Ct) bylo statisticky významné (str<0,05).
Studie krevního séra ukázala, že 64/74 (86,5%) těhotných žen mělo protilátek anti-HSV-IgG během počátečního vyšetření. Anti-HSV-IgG protilátky chyběly u 10 (13,5%) žen. U 2 (2,7%) těhotných žen byla na počátku vyšetření kromě IgG-AT detekována protilátka třídy IgM, což jsou markery akutní fáze infekce.
Při stanovení avidity IgG-AT bylo zjištěno, že u všech 64 (86,5%) žen, které měly IgG-AT k HSV, byly protilátky charakterizovány vysokou aviditou (IA> 50).
Těhotné ženy byly vyšetřovány v dynamice ve třech fázích těhotenství: ve druhém a třetím trimestru a před porodem. Během počátečního vyšetření v druhém trimestru těhotenství byly markery HSV a / nebo PCR detekovány u 12 (14,8%) žen s markery HSV a / nebo PCR. U 8 (12,2%) těhotných žen byla detekce markerů HSV kombinována s detekcí vysoce avidního IgG-AT (IA> 50) s vysokými titry (1: 320). Ze zkoumaných těhotných žen nebyl IgG-AT detekován ve dvou, což naznačovalo primární infekci..
Změna koncentrace IgG-AT nebo detekce AT s vysokými titry v krevním séru studie v dynamice byla doprovázena identifikací přímých markerů HSV během celého vyšetření u 3 těhotných žen. Jeden těhotný IgG-AT nebyl nikdy zjištěn, i přes identifikaci markerů HSV v celé studii..
U 2 (3%) žen byly během počátečního vyšetření detekovány přímé markery HSV v kombinaci s IgM-AT. U jedné z těchto žen skončilo těhotenství spontánním potratem v druhém trimestru..
Ve třetím trimestru těhotenství byly poprvé zjištěny HSV markery u 3 ze 74 těhotných žen. Sérologické vyšetření ukázalo, že jedna žena nemá protilátky proti HSV. Po dalším vyšetření této těhotné ženy se objevil výskyt nízkoprahového (IA<50) IgG-АТ с низкими титрами 1:20. Это указывало на первичное инфицирование. У 2-х пациенток произошла реактивация инфекции, при этом у одной были выявлены высокоавидные IgG-АТ с высокими титрами 1:320, у другой титр антител составил 1:20.
Poslední průzkum žen před porodem ukázal, že HSV markery byly poprvé detekovány u 3 těhotných žen, navzdory přítomnosti protilátek proti HSV, což naznačuje, že herpes infekce byla znovu aktivována.
U 4 (5,4%) byly během vyšetření zjištěny těhotné HSV markery. Při analýze virové zátěže v klinických vzorcích bylo zjištěno, že u 2 těhotných žen se v průběhu těhotenství zvýšilo v průběhu období zvýšení gestační periody: od 100 copDNA / ml během počátečního vyšetření na 10 000 copDNA / ml v posledním vyšetřovacím období. Dvě další změny virové zátěže nebyly zaznamenány..
Podle získaných výsledků tedy od března druhého trimestru těhotenství reagovalo 15 (20,3%) 74 těhotných žen s herpes infekcí. Primární infekce byla diagnostikována u 3 (4,0%) těhotných žen a 2 (2,7%) pacientů bylo infikováno ve druhém trimestru těhotenství a 1 (1,3%) ve třetím. 49 (66,2%) těhotných žen mělo asymptomatický transport. U 7 (9,5%) žen uvedených v MONIIAG diagnostikovaných s chronickou infekcí HSV, HSV infekce chyběla během těhotenství (obr. 2).
Sérologické vyšetření 74 těhotných žen v dynamice ukázalo, že reaktivace herpetické infekce není vždy doprovázena identifikací vysokých titrů IgG-AT nebo zvýšením titrů v dynamice. Tedy u 3 z 15 (40%) žen, při reaktivaci HSV, titry IgG-AT byly detekovány s nízkými hodnotami (1:20 až 1:80).
Závěry
Frekvence detekce markerů herpetické infekce u těhotných žen závisí na použitých diagnostických metodách (virologické, molekulární biologické, sérologické) a na studovaném diagnostickém médiu (krev, moč, urogenitální výkaly). Molekulární biologické metody (PCR, PCR-rt) mají největší diagnostickou hodnotu při zkoumání materiálu z takových médií, jako jsou moč a urogenitální výpalky.
Reaktivace herpetické infekce není vždy doprovázena identifikací vysokých titrů IgG-AT nebo zvýšením titrů v průběhu času. To naznačuje nízkou schopnost imunitního systému těhotné ženy vyvinout dostatečné množství protilátek dokonce i za přítomnosti přímých markerů HSV a prokazuje potřebu imunoterapeutických opatření u těhotných žen s vysokým rizikem infekce.
Podle materiálů www.rmj.ru/
Literatura
- Makatsariya A.D., Bitsadze V.O., Akinshina S.V. Syndrom systémové zánětlivé odpovědi v porodnictví. M .: Med. informovat agentury. 2006. str. 448.
- Nikonov A.P., Astsaturova O.R. Genitální herpes a těhotenství // Gynekologie. 2002. 4. díl č. 1. P. 4-6.
- Poletaev AV, Budykina TS, Morozov S.G. Infekce matky jako příčiny fetální a novorozenecké patologie // Alergologie a imunologie. 2001. V. 2. č. 2. str. 110-116.
- Zinzerling A.V., Melnikova V.F. Perinatální infekce: praktická příručka // Praktické. hands-on. Petrohrad: Epby Petrohrad, 2002, s. 352.
- Anzivino E., Fioriti D., Mischitelli M. a kol. Stav epidemiologie, epidemiologie, diagnostiky, prevence a prevence // Virol. J. 2009. Vol. 6. č. 40. P. 1-11.
- Bursrein D.N. Sekálně přenášené léčebné pokyny // Current Opin. Pediatrie. 2003. Vol. 15. P. 391-397.
- Suligoi B., Cusan M., Santopadre P. a kol. HSV-2 specifická séroprevalence mezi různými populacemi v Římě v Itálii. Italské fórum herpes managementu // Sex Transm. Infect. 2000. Vol. 76, str. 213-214.