Diagnostika protozoálních infekcí

Ne všechny protozoa (protozoa), parazité u lidí, jsou příčiny chorob. K detekci typu patogenu a potvrzení klinické diagnózy nelze provést bez metod laboratorní diagnostiky. Nejjednodušší, kdo se usadil v lidském těle, může být v různých fázích svého vývoje.

Třídy parazitů a studované biomateriály

Nejjednodušší jsou rozděleny do 4 tříd:

  • Kornogawks (Rhizopoda) - představují amoebas u lidí;
  • flagellata (flagellata) - hlavní patologický zástupce - Leishmania;
  • ciliata (ciliata) - nejčastější příčinný účinek onemocnění - balantidia;
  • sporozoa (sporozoa) - nebezpečný parazit této skupiny - Plasmodium malárie.

Když encystující mikroorganismus získává zaoblený tvar a je pokryt ochranným pláštěm. Ve formě cyst jsou protozoáty méně náchylné k nepříznivým vlivům prostředí..

Lokalizace patogenních mikroorganismů může být v různých orgánech a tkáňových strukturách. Proto výběr materiálu pro studium závisí na tom, kde může být parazit.

Výzkumy mohou zahrnovat:

  • krev;
  • kostní dřeň;
  • obsah abscesů (v játrech, plicích, mozku);
  • obsah dutin (břišní, pleurální, perikardiální);
  • sputa;
  • moč;
  • výkaly;
  • hlenové a střevní exsudáty, píštěle.

Upozornění: Existuje mnoho diagnostických odrůd. Zvažujeme ty typy, které jsou nejčastější v klinické laboratorní praxi..

Soukromá diagnostika

V každém konkrétním případě je laboratorní technik pověřen nalezením specifického patogenu a někdy jsou na hlavní cestě detekovány další..

Diagnostika kořenových nožů (amoeb)

Existuje 6 druhů tohoto mikroorganismu schopných žít v lidském střevě. Pouze dysenterická améba má klinický význam, nachází se v vegetativní formě a ve formě cyst..

Hlavním způsobem detekce parazitů je výzkum přirozeného (neléčeného) biologického přípravku..

Dále se používají imunologické metody:

  • nepřímá imunofluorescence;
  • nepřímá aglutinace (RNA);
  • radiální imunodifuzi.

Upozornění: sérologické metody jsou neinformující a používají se pouze jako doplněk k hlavním v pochybných případech.

Diagnóza ciliární (ciliate)

Patogenní formou mikroorganismů tohoto rodu je balantidia. Jedná se o mikrob, který způsobuje balantidiasis - onemocnění doprovázené vředovým procesem tlustého střeva. Patogen je detekován v nativním nátěru ve formě vegetativní formy a cyst. Materiál pro rozmazání (výkaly a hlien) se shromažďuje během rektoromanoskopického vyšetření a nasadí se na speciální média..

Doporučit čtení: Balantidiasis: příznaky, léčba a prevence

Diagnostika flageláků (Leishmania, Giardia, Trypanosome, Trichomonas)

Pro lidi, leishmanii, trypanosomy, Giardia, Trichomonas.

Leishmania - mikroby, které způsobují leishmaniózu, jsou vyšetřovány v krevních skvrnách, v kostní dřeni, v kožních infiltrovách. V některých případech při diagnostice Leishmania se kultury aplikují na kultivační média..

Doporučujeme číst: Leishmanióza: příčiny, příznaky, diagnóza, léčba a prevence

Trypanosomy - příčiny spánkové nemoci (americká / africká trypanosomiáza nebo Chagasova choroba).

Africký varianta je určena v počátečním období ve studii periferní krve. Patologické mikroby s progresí onemocnění jsou v materiálech punkování lymfatických uzlin v pokročilých stádiích - v mozkomíšním moku.

Příčinný faktor amerického trypanosomiázy v akutní fázi onemocnění lze nalézt ve formě strašidel. V budoucnu se mozkové parazity nacházejí ve svalových buňkách, myokardu a v neuronech centrálního nervového systému..

Pro diagnostiku trypanosomů pro podezření na Chagasovu chorobu se zkoumaný materiál zkoumá pod mikroskopem při malém zvětšení. Současně se rozetří a hustá kapka předbarvených.

Lamblia, vedoucí parazitický životní styl v duodenu se nachází v žluči nebo v analýze výkalů (cyst).

Doporučujeme číst: Giardia: příznaky, léčba a diagnóza

Trichomonas (střevní, perorální, vaginální) zjištěné mikroskopií materiálů odebraných z postižených sliznic.

Detekce Sporovik (Plasmodium malárie, kokcidózní agens, atd.)

Sporoviki - parazitické formy, které žijí v buňkách, tkáních a tělesných dutinách.

Nejběžnějším a nebezpečnějším druhem člověka je malariální plazmodium, které má 4 hlavní typy patogenů: příčinný činitel třídenní malárie, čtyřdenní malárie, tropická malárie a oválná malárie.

Doporučit čtení: Malárie: příčiny, symptomy, diagnóza, léčba a prevence

Sexuální vývoj plasmodia (sporogony) se odehrává u komárů Anopheles. Asexual (schizogony tkání a erytrocytů) - v játrech jater a lidských erytrocytech. Tyto vlastnosti životního cyklu musí být vzaty v úvahu při diagnostice malárie plasmodium..

Takže u nově nemocného pacienta, v krvi, lze detekovat zárodečné buňky sporogonického cyklu. Ale na vrcholu malarických záchvatů v krvi ve velkých množstvích se objevují schizofy. 

Kromě toho se v různých fázích malárie vyskytují různé formy plasmodia:

  • během chladného období je krev naplněna merozoitem, druhem schizontů;
  • prstencové trofozoity se hromadí v erytrocytech ve výšce teploty;
  • pokles teploty je charakterizován převahou amoebních trophozoitů;
  • během období normálního stavu obsahuje krev dospělé formy schizontů.

Studium původců malárie (Plasmodium malaria) se provádí v nátěru a v husté kapičce.

Morfologické formy parazitů pro jasnou diferenciaci jsou analyzovány specifickým barvením. Tato možnost "vizualizace" vám umožňuje vyčíst jednotlivé morfologické rysy určitého druhu mikroorganismu..

Upozornění: Diagnostika malárie ve studii o rozmazaných a silných kapech krve je někdy chybná. V některých případech se krevní destičky mohou zaměnit za patogen malárie. Plasmodiové fragmenty leukocytů a jiných buněk jsou také někdy simulovány..

Základní metody výzkumu nejjednodušších

Stručně zkontrolujte nejběžnější metody výzkumu pro přítomnost nejjednodušších.

Diagnóza nejjednodušší metody nativního nátěru a nátěru obarveného Lugolovým roztokem (ve stolici)

Léčivo je připraveno z emulze výkalů v izotonickém roztoku. Dvě kapky chloridu sodného a roztoku Lugolu se aplikují na skleněnou sklíčko. Testovací materiál se přidá k oběma formulacím s dřevěnou tyčinkou a po pokrytí skleněným povlakem jsou zobrazeny v různých rozměrech mikroskopu..

Podle určitých vlastností jsou nalezeny nalezené prvoky. Pro přesnost připravte 2-3 drogy ze stejného materiálu. V pochybných případech se analýza opakuje několikrát po dobu 2-3 týdnů..

Metoda dokáže detekovat vegetativní a cystové formy:

  • Giardia;
  • balantidy;
  • dysenterická améba.

Spolu s patogenními formami se také stanoví nepatogenní protozoa. Také u zdravých nosičů jsou luminální a cystické formy..

Je důležité: Výzkumy, aby se předešlo nepřesnostem a chybám, by se měly provádět opakovaně.

Výsledek diagnózy nejjednodušší metodou přirozeného a barevného nátěru by měl obsahovat popis formy patogenu (luminální, cysta, tkáň).

Požadavky na výzkum:

  • odebraný materiál pro analýzu (kapalné výkaly) se vyšetří nejpozději 30 minut po defekaci;
  • zdobené výkaly musí být diagnostikovány do 2 hodin po defekaci;
  • v materiálu by neměly být přítomny žádné nečistoty (dezinfekční prostředky, voda, moč);
  • pro práci s tímto materiálem se používají pouze dřevěné tyče, skleněné nejsou vhodné vzhledem ke slizu;
  • tyčinky by měly být spáleny ihned po použití..

Konzervační metoda (fekální vyšetření) v diagnostice prvoků

Studie se provádí fixací prvoků konzervačním činidlem. Tato metoda se liší od předchozí v tom, že konzervační látky vám umožňují udržet drogu po dlouhou dobu.

Použité konzervační prostředky:

  • Barrow Obsahuje konzervační přísady: 0,7 ml chloridu sodného, ​​5 ml formalinu, 12,5 ml 96% alkoholu, 2 g fenolu a 100 ml destilované vody. Barva: 0,01% roztok thioninu (azura).
  • Safarlievovo řešení. Složky: 1,65 g síranu zinečnatého, 10 ml formalinu, 2,5 g krystalického fenolu, 5 ml kyseliny octové, 0,2 g methylenové modři, 100 ml vody. Tato konzervační látka se používá v případech, kdy materiál musí být skladován déle než měsíc..

Prázdné lahvičky jsou naplněny konzervačním prostředkem, do něho se přenese materiál v poměru 3: 1, v případě potřeby se přidá barvivo. Vyhodnocení výsledků studie 2-3 léčivých přípravků.

Způsob obohacení formalinem a etherem (analýza přítomnosti prvoků ve stolici)

Tato diagnostická metoda umožňuje oddělení a soustředění jednoduchých cyst. Pro analýzu jsou potřebné následující složky: formalin (10 ml), 0,85 g izotonický roztok, destilovaná voda, síranový ether, Lugol roztok.

Směs biomateriálu s uvedenými kapalinami se smísí a odstředí. Sediment získaný na dně zkumavky je obarven Lugolovým roztokem a vyšetřen na přítomnost cyst a vegetativních forem..

Leishmania metoda (skvrna kostní dřeně)

Pro diagnostiku leishmaniózy se používají následující činidla: směs Nikiforova (sírový ether a ethylalkohol), fosfátový pufr, azur-eosin podle Romanovského.

Látka kostní dřeně je velmi pečlivě umístěna na skleněném šoupátku po speciální přípravě. Použité mikroskop s ponorným systémem.

V akutním období onemocnění se v bodě vyskytuje velké množství leishmanie..

Upozornění: někdy se mohou krvinky podobat zpracované Leishmanii, takže je velmi důležité, aby byl laboratorní technik opatrný a měl dostatek zkušeností pro nezávislý výzkum..

Metoda detekce Leishmanie v nálevu z infiltrace kůže

Nutné činidla jsou podobné předchozí analýze..

Testovací materiál se získává z existujícího obsahu tuberkulózy nebo vředů. Škrábání pro podezření na leishmaniózu probíhá velmi pečlivě pomocí skalpelu bez krve. Pak se preparát připravuje na skle. Pro přesnost získaných výsledků se současně zkoumá několik léků..

Pokud se vyskytuje onemocnění, stanoví se makrofágy, fibroblasty, lymfoidní buňky přítomné ve studovaném materiálu a Leishmania.

Způsob izolace čisté kultury leishmanie získané štěpením patologických tkání

Tímto způsobem diagnostiky je nejjednodušší škrábání tkání umístěno do speciálního živného média, ve kterém dochází k aktivní reprodukci leishmanie..

Před sběrem škrábání je pokožka důkladně ošetřena alkoholem, poté je z tuberkulózy vytvořen řez, ze kterého je obsah odstraněn a umístěn ve zkumavce s médiem. Materiál je několikrát pořízen, poté je umístěn v různých trubkách. Potom v termostatu při teplotě 22-24 stupňů nastává kultivace. Výsledky jsou hodnoceny pod mikroskopem. Tato metoda se používá, když jiné, levnější a rychlejší způsoby diagnostiky nejjednodušších jsou neúčinné..

Chcete-li vidět, jak v praxi testy na přítomnost těch nejjednodušších kvapkou krve jsou dešifrovány, můžete sledováním přehledu videa: 

Lotin Alexander, lékařský posudek